香樟叶片DNA提取方案?CTAB-学生作业帮-兵器谱
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香樟叶片DNA提取方案?CTAB

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 时间:2019/04/19 04:18:19

香樟叶片DNA提取方案?
CTAB

1.将植物组织洗净,用75%的酒精表面消毒4-5min,用去离子水冲洗3次;
2.将样品放在灭过菌的研钵中,加入液氮捣碎,迅速转入1.5ml离心管中,加入600mlCTAB(或同时加入石英砂和CTAB研磨,然 后转入1.5ml离心管中);
3.65℃水浴1h(每20min反转摇匀一次);
4.加等体积的氯仿-异戊醇(体积比24:1),颠倒混匀;
5.6500rpm离心30min,取上清于新管中;
6.重复4,5步骤;
7.向上清中加入2倍体积的无水乙醇沉淀DNA,-20℃放置20min或更长时间,或过夜;
8.12000rpm离心5min,去上清;
9.加75%的乙醇清洗DNA,每次12000rpm 2min,去上清;
10.风干后加入40ul的TE缓冲液溶解DNA;
11.取2ul溶液电泳检测.

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